【LB培养基的配制】LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛应用于分子生物学和微生物学领域的基础培养基,特别适用于大肠杆菌(Escherichia coli)等原核生物的培养。其成分简单、营养丰富,能够支持多种细菌的快速生长。本文将对LB培养基的配制方法进行总结,并以表格形式展示关键信息。
一、LB培养基简介
LB培养基由三部分组成:胰蛋白胨(Tryptone)、酵母提取物(Yeast Extract)和氯化钠(NaCl)。这些成分分别提供氮源、维生素和矿物质,以及维持渗透压平衡。根据实验需求,LB培养基可以制成液体或固体形式,后者需加入琼脂(Agar)作为凝固剂。
二、配制步骤(以1 L为例)
步骤 | 操作内容 |
1 | 准备所需试剂:胰蛋白胨 10 g、酵母提取物 5 g、氯化钠 10 g(如为固体培养基,还需加入15–20 g琼脂) |
2 | 将上述成分依次加入蒸馏水中,搅拌至完全溶解 |
3 | 加入蒸馏水至总体积为1 L |
4 | 用磁力搅拌器或手动搅拌均匀 |
5 | 使用pH计检测并调整pH值至7.0–7.2(通常无需额外调节,因原料本身已接近此范围) |
6 | 高压灭菌:在121℃下灭菌15–20分钟 |
7 | 冷却至适宜温度后分装,备用 |
三、LB培养基种类及用途
类型 | 成分 | 用途 |
LB液体培养基 | 胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g | 用于细菌的扩增培养 |
LB固体培养基 | 同上 + 琼脂15–20g | 用于平板划线、菌落筛选等 |
SOC培养基 | 在LB基础上添加葡萄糖(20 g/L) | 提高转化效率,常用于感受态细胞转化实验 |
四、注意事项
- 所有试剂应使用分析纯或生化级,确保无杂质。
- 配制过程中避免高温长时间加热,以免破坏有机成分。
- 灭菌后应尽快使用,避免污染。
- 若需长期保存,可分装后冷冻保存,但建议每次使用前重新灭菌。
五、总结
LB培养基因其配方简单、成本低廉且适用性强,成为实验室中不可或缺的基础培养基之一。正确配制并合理使用,能够有效提高实验成功率与数据可靠性。通过表格形式整理配制方法与用途,有助于实验人员快速掌握关键信息,提升实验效率。